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類(lèi)器官培養(yǎng)試劑盒(肝癌、結(jié)腸癌、腎癌)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

肺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基是一款促進(jìn)肺癌類(lèi)器官體外形成和擴(kuò)增的培養(yǎng)基。該產(chǎn)品為無(wú)菌的液體混合系統(tǒng),含有維持目的細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物以及生長(zhǎng)因子等。該培養(yǎng)基的獨(dú)特配方可以提供一個(gè)合適的細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,促進(jìn)肺癌類(lèi)器官的體外生長(zhǎng)和擴(kuò)增。

產(chǎn)品型號(hào):
更新時(shí)間:2025-09-19
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問(wèn)量:103
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品牌LAB-AIXS/蘭伯艾克斯

類(lèi)器官培養(yǎng)試劑盒(肝癌、結(jié)腸癌、腎癌)


使用方法


1、原代

(1)取材后的組織須放在預(yù)冷的(2-8°C)組織保存液 E 的取樣瓶中,快速轉(zhuǎn)運(yùn)至潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行組織處理和細(xì)胞分離,拍照并登記信息。
(2)準(zhǔn)備若干培養(yǎng)皿,加入 4℃預(yù)冷的原代培養(yǎng)緩沖液 B 備用。
(3)取樣瓶消毒,將組織放入培養(yǎng)皿中,利用原代培養(yǎng)緩沖液 B 清洗三次后,利用眼科jian或手術(shù)dao將組織jian切成體積約為 1-3mm3 的組織塊。
(4)組織用人乳腺癌原代組織消化ye C 消化,37℃震蕩消化10-20min,(消化過(guò)程中隨時(shí)觀察消化情況)。
(5)取少量液體在顯微鏡下觀察,鏡下觀察到較多的單個(gè)細(xì)胞或 70um 以下的細(xì)胞簇后,加入三倍體積原代培養(yǎng)緩沖液 B 終止消化。
(6)使用100um孔徑的篩網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾,將濾液收集后,于300g富集離心5min后移去上清,添加原代培養(yǎng)緩沖液 B 重新重懸離心。
(7)基質(zhì)膠計(jì)算:第6步后觀察收集到的組織體積,添加25倍組織體積的基質(zhì)膠(abs9495)重懸鋪板。
(8)24孔細(xì)胞培養(yǎng)板為例,每孔點(diǎn)膠25ul組織基質(zhì)膠混合物進(jìn)行鋪板(4℃下操作)。
(9)將鋪好的培養(yǎng)板放入37℃培養(yǎng)箱中10-15min成膠,添加人乳腺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基 A(恢復(fù)室溫)進(jìn)行培養(yǎng)。
2、類(lèi)器官傳代培養(yǎng)
(1)移液槍吸去培養(yǎng)基,每孔添加1-2ml 4℃類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 放置2min。
(2)移液槍輕柔吹打基質(zhì)膠,收集在15ml離心管中,4℃靜置10min。(每6-8孔為一組)
(3)a:類(lèi)器官數(shù)量不足或體積較小時(shí): 離心5min棄去上清,添加適量類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 重懸移入1.5ml離心管,300g離心5min棄去液體進(jìn)行第4步。
        b:類(lèi)器官數(shù)量較多或體積較大時(shí):離心5min棄去上清,添加適量類(lèi)器官傳代消化液 D 消化2-3min,添加類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 終止消化,離心5min棄去混合液,添加適量類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 重懸移入1.5ml離心管,300g離心5min棄去液體進(jìn)行第4步。
(4)類(lèi)器官收集后,添加基質(zhì)膠重懸,每孔25ul基質(zhì)膠鋪在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,放置培養(yǎng)箱中10-15min添加500ul人乳腺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基 A。
3、類(lèi)器官凍存
(1)移液槍吸去培養(yǎng)基,每孔添加1-2ml 4℃類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 放置2min。
(2)移液槍輕柔吹打基質(zhì)膠,收集在15ml離心管中,4℃靜置10min。(每6-8孔為一組)
(3)離心5min棄去上清,添加適量類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 再次重懸,300g離心5min棄去液體。
(4)添加適量類(lèi)器官凍存液 F,輕柔吹打重懸,以24孔細(xì)胞培養(yǎng)板為例:密度為2個(gè)孔凍存1管,每管體積1.4ml。
(5)做好標(biāo)記信息,進(jìn)行程序降溫后,移入液氮長(zhǎng)期保存。
4、類(lèi)器官?gòu)?fù)蘇
(1)取10ml類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 于15ml離心管中。
(2)從液氮罐中取出凍存的類(lèi)器官細(xì)胞,快速置于 37℃水浴鍋中融解。
(3)水浴融解過(guò)程中,需輕輕搖動(dòng)冷凍管,以確保凍存液在 1-2min內(nèi)融解。
(4)將溶解后的類(lèi)器官細(xì)胞快速轉(zhuǎn)移至15ml 離心管,使用移液管輕輕吹打6-8次,300g 離心 5min,然后除去上清液并收集類(lèi)器官細(xì)胞沉淀。添加適量類(lèi)器官傳代培養(yǎng)緩沖液 G 重懸移入1.5ml離心管300g離心5min。
(5)基質(zhì)膠重懸,每孔25ul基質(zhì)膠鋪在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,放置培養(yǎng)箱中10-15min成膠,添加500ul人乳腺癌類(lèi)器官培養(yǎng)基 A。



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